测 注意：所有抗体均使用0.5％NFDM作为封闭剂和Luminata™Forte Western HRP进行测试作为化学发光试剂的底物。 印迹阻止 •SNAPi.d.®2.0系统与比较常用的封闭剂兼容，包括脱脂/低脂干燥牛奶，牛血清白蛋白（BSA）和酪蛋白。许多其他市售阻滞剂也兼容（请参阅表5）。•为了确保比较佳的墨量通过吸墨架，必须完全封闭封闭液溶解且不含所有颗粒物质。在某些情况下，可能有必要降低封闭剂以达到所需的流量。•不建议使用浓度高于0.5％的脱脂/低脂干奶。•封闭剂应在含有0.1％Tween®20的tris或磷酸盐缓冲盐溶液中制备表面活性剂，以降低表面张力并确保封闭剂在印迹架上均匀分布表面。•为确保抗体在孵育步骤中均匀分布，请在封闭液中稀释抗体，包含Tween®20表面活性剂。 如何使益启生物公司带您了解Merck仪器。虹口区Merck仪器报价
盘，请在步骤5之后插入托盘。有关详细信息，请参阅“抗体恢复”部分。 6.在整个表面上涂适量的一抗吸墨纸架的数量（对于MultiBlot为2.5毫升，对于迷你吸墨纸为5毫升，或10 mL用于Midi印迹）。7.在室温下孵育10分钟。解决方案将是吸收到污点固定器中，表面可能会变干。重要提示：请勿在吸尘器清洁后再使用真空吸尘器。孵育10分钟。8.向下压框架并施加真空。等待5-8秒，直到框架完全是空的。9.在连续运行真空的情况下，添加30 mL洗涤缓冲液（MultiBlot为15毫升）。重复洗涤步骤3次以上（总共4次洗涤）。当框架完全为空时，将TURN真空关闭。10.在印迹架的表面上涂适量的二抗（对于多印迹，为2.5 mL，5毫升用于迷你印迹，或10毫升用于Midi印迹）。在室温下孵育10分钟，然后静安区Merck仪器联系电话益启生物是默克细胞计数器的代理商。
lon@CrescendoWesternHRP基材WBLUR0500500毫升Immobilon@ClassicoWesternHRP底材WBLUC0500500毫升Immobilon@WesternHRP基材WBKLS05零零5零零毫升Immobilon@ECLUltraWestemHRP基材WBULS05零零5零零毫升TMB，不溶61毫升用于免疫检测的Immobilon@信号增强剂WBSH05S05零零5零零毫升免疫印迹封闭剂20-20020克Re-BlotTMPlus强力抗体剥离解决方案，10倍25毫升Immobilon@Block-CH缓冲液WBAVDCH01S05零零毫升Immobilon@Block-FL缓冲液WBAVDFL01500毫升Immobilon@Block
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Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前，先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5％脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时，确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1％Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器（例如5毫升），慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL（用于MultBlot），5 mL（用于Mini blot）或10 mL（用于Midi印迹）抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔，回收托盘algnMerck样本制备仪上海授权代理商。黄浦区Merck细胞计数器Merck仪器报价
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密封的平板/m歧管组件放在倒置显微镜。6.在扩展的灌注实验中，定期将7孔倒空至避免出口溢流到歧管和灌注系统中。在CellASICOONX2软件的“运行”选项卡上，单击“暂停”按钮。按下仪器上或“工具”下拉菜单中的“密封”按钮在下拉菜单中，单击开封板。从板，并抽吸良好。7.将歧管重新密封到板上，然后在在“运行”选项卡上，单击“恢复”以重新启动每个融合协议。解决方案切换1.从选定的进水口（1-5）吸出溶液。加至350μL所需的解决方案。如果少于四个单位（A-D）使用时，用缓冲液填充未使用的进口井，以防只托水。2.根据以下说明将微流体板密封到ONIX2歧管上：CellASIC@ONIX2微流体系统用户指南。3.打开CelIASICOONIX2软件，在下拉列表，然后单击ProtocolEditor选虹口区Merck仪器报价
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